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小鼠胚胎成纖維細生

出自Taiwan Tongues 台語維基
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小鼠胚胎成纖維細生(Mouse Embryonic Fibroblasts (MEF))是一種自小鼠胚胎中分離來的成纖維細胞。算講佇體外培養的時陣,MEF 細胞佮其他類型的成纖維細胞仝款,呈現長期的梭形。MEF 細胞屬於有限細胞系,踮佇咧幾若改傳代後會衰老,增殖生長能力下降,最後漸漸死亡去。若想欲使 MEF 細胞能無限生長分裂,著愛使用一寡手段著其進行永生化。目前是較捷用的手段有病毒抑是病毒因為(如 SV 四十大 T 抗原)轉化、濟擺傳代等。經過永生化的 MEF 細胞會當無限增殖分裂,毋過性地嘛會發生一寡改變。

MEF 細胞佇性命科學研究,尤其是幹細胞研究當中搬演重要角色。實驗室內底常用的細胞系之一 NIH 三 T 三即即為永生化的 MEF 細胞。

製備佮培養

製備 MEF 細胞,需要有身的鼠仔。共有身小鼠麻醉後斷頷頸處死了後,佇生物安全櫃中使用無菌操作破開其腹肚,共鳥鼠胚胎提出,共這佮胎盤剝離起來。鳥鼠仔胚胎落去、肝後消毒,然後使用鼻芳進行消化,著浮懸的單一个細胞。共遮的細胞種入組織培養皿中進行培養,著愛原代培養的 MEF 細胞。體外培養的 MEF 細胞使用加有百分之十胎牛血清(FBS)的 DMEM 培養基培養就會當。會當根據需要,加入百分之一青黴素-鏈黴素以減少細菌污染風險。MEF 傳代,使用腰尺消化細胞,閣以一 : 五的比例將細胞轉入新的培養皿中。

應用

一九六三年,兩名紐約大學醫學部的研究人員,即喬治 ・ 托達洛(George Todaro)佮伊德 ・ 格林(Howard Green)通過反起傳代取得著永生化的 MEF 細胞。遮的細胞經過鑑定、發展,成做是今仔日生物實驗室定用的 NIH 三 T 三細胞系 。

經過絲裂黴素抑是伽瑪射線處理的 MEF 細胞無閣有分裂能力,會當佇胚胎幹細生培養中用作滋養層,分泌信號分子,創建類似於胚胎的微環境,利於胚胎幹細生佇體外生長。二空空六年,山中伸彌通過轉入四个山中因子(Klf 四、Oct 四、Sox 二、c-Myc), 將 MEF 細胞重變成做佮胚胎幹細胞相𫝛的 iPS 細胞,成功使動物終尾分化的細胞脫分化,對幹細胞生物學的基礎研究佮應用研究攏有重要意義。

參見

  • 成纖維細胞
  • 胚胎幹細胞

參考