Kaede
Kaede,一種光激活螢光卵白質,起源佇自然狀態的石珊瑚目的彎彎曲曲紋珊瑚(Trachyphyllia geoffroyi)。 Kaede 佇日語內底就是楓葉。做被紫外光輻照(三百五十尺四百 nm)時,kaede 會有對綠色螢光到紅色螢光的不可逆光轉換。伊是一百十六 kDa 的人四聚物卵白質。根據推斷作為其主要結構的四聚物結構干焦二十八 kDa。這款四聚體化可能致使著 kaede 結合著其他的卵白質時形成聚合物的可能性較低。
發現
kaede 的光轉換螢光特性於偶然得知,首先由 Ando et al . 佇美國家科學院 [一] 刊物報導。佇咧工作台頂閣曝光的時陣,kaede 的一部份發現發射紅色螢光。隨後證實表明 kaede 初初發射綠色螢光,曝佇紫外口了後隨光轉換,發射紅色螢光,因為按呢號名 kaede。
應用
像所有的其他螢光卵白,kaede 通做基因表達的局部光標記物佮細胞行為研究的卵白質標記物 [二]。 誠有路用的一種應用是神經元的視覺呈現。因為薄薄仔突起來互相膏膏纏做伙,單獨的神經元輪交難得刻畫出來。 kaede 發現了後,用來呈現單一个神經元的形態真有路用。神經元轉染 kaede cDNA 後,用紫外光輻照,光轉換以後的紅色螢光態的 kaede 自由散布於無包括核區的細胞,延伸到樹突和軸突區域,這種技術幫助解決矣因為高密度的培養神經細胞複雜網絡的問題 [三]。 紫外光引起螢光色的改變,就算講干焦一部份 kaede 干焦轉換矣,標記細胞佮亞細胞結構猶閣有效。
優點
干焦轉換了後,kaede 發射明亮而穩定的紅色螢光,並且會當佇有氧條件下繼續幾月。紅色螢光態佮綠色的閣較光更加穩定,無光轉換的綠態發射紅色螢光強度非常低。 佮其他干焦轉換進前卵白質,kaede 發射光明顯的綠色螢光。 kaede 的轉換光佮激發光通好完全區分。
限制
雖罔 kaede 光轉換進前後發射紅-綠螢光強倍率是兩千,佇多標記方面同時利用紅綠螢光亦可引起問題。kaede 四聚物化可能干擾標記卵白的定位佮追蹤。遮的限制矣 kaede 用做蛋白標記物。
參考
一 . Ando , R . , Hama , H . , Hino , M . K . , Mizuno , H . , and Miyawaki , A . ( 兩千空二 ) . An optical marker based on the UV-induced green-to-red photoconversion of a fluorescent protein . Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 九十九 ( 二十 ) , 一孵兩千六百五十一孵六 . 二 . Mizuno , H . , Mal , T . K . , Tong , K . I . , Ando , R . , Furuta , T . , Ikura , M . , and Miyawaki , A . ( 兩千空三 ) . Photo-Induced Peptide Cleavage in the Green-to-Red Conversion of a Fluorescent Protein . Cell Press 十二 ( 四 ) , 一千空五十一孵八 . 三 . Schwartz , J . L . , Bonnet , N . A . , and Patterson , G . H . Photobleaching and photoactivation : following protein dynamics in living cells . 四 . Mutoh , T . , Miyata , T . , Kashiwagi , S . , Miyawaki , A . , and Ogawa , M . ( 二千空六 ) . Dynamic behavior of individual cells in developing organotypic brain slices revealed by the photoconvertable protein Kaede . Experimental Neurology 兩百 ( 二 ) , 四百三十尺七 . 五 . Tomura , M . , Yoshida , N . , Tanaka , J . , Karasawa , S . , Miwa , Y . , Miyawaki , A . , and Kanagawa , O . ( 兩千空八 ) . Monitoring cellular movement in vivo with photoconvertible fluorescence protein「Kaede」transgenic mice . Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 一百空五 ( 三十一 ) , 一孵空八百七十一孵六 . 六 . Dittrich , P . S . , Scha , S . P . and Schwille , P . ( 兩千空五 ) . Characterization of the Photoconversion on Reaction of the Fluorescent Protein Kaede on the Single-Molecule Level . Biophysical Journal 八十九 , 三千四百四十六標五十五 .